Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Микробиологическая диагностика кампилобактериозов

Читайте также:
  1. IV. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции
  2. Амиотрофический боковой склероз. Этиология. Патогенез. Классификация. Клиника. Диагностика. Лечение. Прогноз.
  3. Вирусологическая диагностика аренавирусных инфекций
  4. Вирусологическая диагностика герпеса
  5. Вирусологическая диагностика натуральной оспы
  6. Вирусологическая диагностика ОРВИ
  7. Вирусологическая диагностика острых респираторных вирусных инфекций и гриппа

Возбудителями кампилобактериозов - кишечных инфекций, склонных к генерализации и вы­раженным токсико-аллергическим осложнениям, являются Campylobacter jejuni и Campylobacter coli. Оппортунистические инфекции различной локализации и тя­жести вызываются преимущественно Campylobacter fetus.

Материалом для исследования в зависимости от характера за­болевания являются испражнения, гной, ликвор, кровь, рвотные массы и др., которые с учетом нестойкости возбудителя во внешней среде должны быть доставлены в лабораторию как можно скорее.

Бактериоскопический метод является весьма чувствительным ввиду характерной морфологии кампилобактеров (грамотрицательные изогнутые, S-образные или извитые палочки размером 0,2- 0,9x0,5-5,0 мкм).

Бактериологический метод. Для выделения чистых куль­тур исследуемый материал засевают на селективные плотные среды (с кровью, факторами роста и антибиотиками) или используют для выделе­ния метод фильтрации. Неконтаминированный материал засевают на неселективные среды обогащения (бруцеллезные бульон или агар, содержащий пептон, дрожжевой эк­стракт, глюкозу и гидросульфит натрия в качестве редуцента).

Селективные среды (Скирроу, Престо­на, эритрит-агар) для кампилобактеров содержат баранью кровь (фактор роста) и селективные добавки (антибиотики триметоприм, ванкомицин, амфотерицин Д, полимиксин В и цефалотин), ингибирующие рост нормальной микрофлоры. Культивирование кампилобактеров осуществляется в специальной газовой атмосфере, состоящей из азо­та, углекислого газа и кислорода в соотношении 85:10:5, ко­торая создается применением специальных газогенераторных пакетов, по­мещаемых вместе с посевами в герметично закрывающиеся емкости. Посевы инкубируют при 420 С.

Метод фильтрации основан на способности подвижных кам­пилобактеров активно проходить через мембранные фильтры с по­рами диаметром 0,45 — 0,65 мкм. Фильтр укладывают на поверхность неселективной плот­ной среды в чашке Петри, наносят на него 10—15 капель суспензии фе­калий, инкубируют чашку при 370 С в течение 1 ч, после чего фильтр снимают, а чашку инкубируют в микроаэрофильных условиях. Проникшие через фильтр кам­пилобактеры образуют через 48 — 96 ч на поверхности среды характерные колонии - серые, плоские, с неровным краем, сливаю­щиеся по ходу штрихов. На бо­лее сухих средах колонии выпуклые, блестящие, округлые, без выраженной тенденции к распространению; гемолиз отсутствует.

Выделенные культуры идентифицируют по морфологии (маз­ки, окрашенные по Граму), характерной «винтообразной» под­вижности (исследование в препарате «раздавленная капля с использованием темнопольной или фазово-контрастной микроско­пии), биохимическим свойствам и чувствительности к антибио­тикам. Основные свойства некоторых видов кампилобактеров и Helicobacter pylori представлены в таблице 12. Важным признаком С. jejuni является гидролиз гиппурата натрия (в 0,4 мл 1% водного раствора гиппурата суспендируют петлю выделенной куль­туры, пробирку помещают на 2 часа в термостат при 370 С, после чего добавляют 0,2 мл 3,5% раствора нингидрина в ацетон-бутаноловой смеси и вновь помещают в термостат). Пурпурное окрашивание взвеси свидетельствует о положительная пробе. Культура с типичной морфологией, выросшая при 42 °С на селективной среде, положительными пробами на оксидазу и на гидролиз гиппурата, относится к виду С. jejuni.

Нитратный тест культуру выполняют на нитрат­ном бульоне Барретта или полужидкой среде Мюллера-Хинтона с 0,2 % нитрата калия; тест-реактивом является сульфоновая кислота в смеси с нафтиламином. Положительный нитратный тест характеризуется появлением красного окрашивания.

Таблица 12. Дифференциация некоторых видов кампилобактеров и Helicobacter pylori

 

Биологические свойства Campylobacter Jejuni Campylobacter coli Campylobacter fetus Helicobacter pylori
Рост при 420 С + + - -
Рост при 250 С - - + -
Уреаза - - - +
Нитратредуктаза + + + -
Гидролиз гиппурата натрия + - - -
Каталаза + + + +
Устойчивость к:        
налидиксовой кислоте ± - ± +
Цефалотину + + - +

 

Обозначения: (+) - наличие свойства, (-) - отсутствие свойства, (±) – непостоянное свойство

 

 

Генодиагностика. Для диагностики кампилобактериоза предложена ПЦР.

Серологическая диагностика при кампилобактериозе не прово­дится из-за наличия у кампилобактера групповых антигенов и возникновения вследствие этого перекрестных реакций антител против этого микроорганизма с другими микробами.


Дата добавления: 2015-09-03; просмотров: 84 | Нарушение авторских прав


Читайте в этой же книге: Микробиологическая диагностика чумы. | Микробиологическая диагностика туляремии | Микробиологическая диагностика сибирской язвы | Самостоятельная работа студентов | Микробиологическая диагностика бруцеллеза | Микробиологическая диагностика лептоспироза | Ознакомиться со схемой лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов | Изучить основные этапы бактериологического метода диагностики брюшного тифа. | Микробиологическая диагностика сальмонеллезов | Микробиологическая диагностика эшерихиозов |
<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Микробиологическая диагностика иерсиниозов| Микробиологическая диагностика геликобактериоза

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.007 сек.)