Студопедия
Случайная страница | ТОМ-1 | ТОМ-2 | ТОМ-3
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатика
ИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханика
ОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторика
СоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансы
ХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника

Работа 3. Определение константы скорости пероксидазной реакции .

Читайте также:
  1. I. Кинетика и механизм пероксидазной реакции
  2. I. Назначение и принцип работы зубофрезерных станков, работающих червячной фрезой
  3. I. Определение группы.
  4. I. ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ПРОБЛЕМЫ МЕТОДА
  5. I. Определение и проблемы метода
  6. I. Подготовительная работа.
  7. I. Подготовительная работа.

 

Как указывалось выше (см. стр. 2 – 3), для двусубстратной реакции возможно из экспериментальных данных определить одну из констант скоростей () и выражения, содержащие набор элементарных констант скоростей, более простых, чем эффективные константы Михаэлиса и максимальные скорости пероксидазной реакции. Для этого необходимо определить эффективные константы Михаэлиса по пероксиду водорода при разных начальных концентрациях второго субстрата – KI. Для определения константы скорости строят зависимость обратной величины эффективной максимальной скорости от обратной величины концентрации йодида. Отрезок, отсекаемый прямой на оси ординат, равен . Концентрацию пероксидазы определяют спектрофотометрически при 400 нм (полоса Соре). Коэффициент молярного поглощения гем-группы ε = 9.5∙104 М–1×см–1.

 

Порядок выполнения задачи.

1. Определите эффективную максимальную скорость реакций и эффективную константу Михаэлиса по H2O2, как описано в работе 2 для 3 – 4 концентраций KI.

В таблице 7 приведены составы реакционных смесей, рекомендуемые при выполнении данной работы.

Таблица 7.

Опыт 1. [KI]исх = 6×10–3 М, [KI]оп = 3×10–3 М

KI, мл Ацетатный буфер, мл Пероксидаза, мл H2O2 (4×10–3 М), мл
  2.0 1.85 0.1 0.05
  2.0 1.8 0.1 0.1
  2.0 1.7 0.1 0.2
  2.0 1.4 0.1 0.5
  2.0 0.9 0.1 1.0

 

Опыт 2 [KI]исх = 6×10–3 М, [KI]оп = 3.75×10–3 М

  2.5   0.1 0.05
  2.5   0.1 0.1
  2.5   0.1 0.2
  2.5   0.1 0.5
  2.5   0.1 1.0

 

Опыт 3. [KI]исх = 6×10–2 М, [KI]оп = 7.5×10–3 М

  0.5   0.1 0.05
  0.5   0.1 0.1
  0.5   0.1 0.2
  0.5   0.1 0.5
  0.5   0.1 1.0

 

Опыт 4. [KI]исх = 6×10–2 М, [KI]оп = 3.0×10–2 М

  2.0   0.1 0.05
  2.0   0.1 0.1
  2.0   0.1 0.2
  2.0   0.1 0.5
  2.0   0.1 1.0

 

Здесь [KI]исх – концентрация используемого для приготовления реакционных смесей раствора; [KI]оп - концентрация йодистого калия в реакционной смеси.

 

2. Рассчитайте величины K M иV, одним из возможных способов (см. стр!!.)

3. Постройте зависимость 1/V от 1/[KI]0 и определите величину . Концентрацию пероксидазы уточните у преподавателя.

4. Покажите преподавателю полученные значения эффективных констант Михаэлиса и значение константы скорости реакции .

 


Дата добавления: 2015-07-10; просмотров: 81 | Нарушение авторских прав


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Работа 2. Определение эффективных значений константы Михаэлиса и максимальной скорости реакции по пероксиду водорода| Основные положения

mybiblioteka.su - 2015-2024 год. (0.007 сек.)